
PROALT - Protein Alternatives ofrece servicios de expresión de proteínas, desde el clonaje del gen hasta la producción a gran escala, destinados a acelerar su investigación. Nuestro equipo experimentado le asegura niveles de expresión y purificación de proteínas elevados. Nuestros servicios son a medida del cliente para satisfacer las necesidades de la industria, y de investigadores académicos y gubernamentales.
La elección de un Servicio de Expresión de Proteínas depende de diversos factores, que van desde sus requerimientos en relación al coste económico, el tiempo de ejecución disponible para sus proyectos y los perfiles de modificaciones post-transduccionales de sus proteínas.
| Sistema de Expresión | Ventajas | Desventajas |
|---|---|---|
| Bacterias | Bajo coste. Rápido. Fácil manipulación y escalado. | Despliegue defectuoso de las proteínas. Ausencia de modificaciones post-transduccionales. Utilización de codones diferentes. |
| Baculovirus | Ambiente eucariótico. Niveles elevados de expresión de genes recombinantes. Fácil escalado. | Expresión discontinua. Menos rápido y más costoso que los sistemas procariotas. Glicosilación diferente a la de mamíferos. |
| Mamíferos | Niveles más elevados de procesamiento post-transduccional de las proteínas. | Rendimientos de proteína bajos. Menos rápido y más costoso que los sistemas de bacterias y baculovirus. |
| Fragmentos inmunogénicos (iFRAG) en bacterias | Bajo coste. Rápido. Buena inmunogenicidad para la producción de anticuerpos. | Pueden existir diferencias conformacionales respecto a la forma nativa de la proteína. Sin glicosilación. |
| Tag | Residuos | Tamaño (kDa) | Uso | Matriz / Elución | Sistema de Expresión |
|---|---|---|---|---|---|
| Poli-histidinas (6xHis) | 6 | Purificación | Metal divalente / imidazol | Bacterias Baculovirus Mamíferos iFRAG | |
| Glutatión S-transferasa (GST) | 211 | 26 | Purificación, mejora de la solubilidad | Agarosa glutatión / glutatión | Bacterias Baculovirus |
| Proteína de unión a maltosa (MBP) | 396 | 40 | Purificación, mejora de la solubilidad | Resina de amilosa / Maltosa | Bacterias |
Todos los pasos, desde el clonaje del gen hasta la purificación de la proteína, se encuentran disponibles como módulos independientes para satisfacer sus requerimientos especializados. Como la expresión adecuada depende de las características propias de cada proteína, la producción exitosa de cada proteína de interés no puede garantizarse con anterioridad. Por tanto, sólo se facturarán a los clientes aquellos Hitos o Fases del Proyecto que hayan sido completadas.
Un iFRAG (Immunogenic Fragment) puede definirse como un fragmento de proteína que comprende entre 100-150 residuos aminoácidos consecutivos, la cual se espera represente una secuencia única de proteína y que está optimizada para su expresión en E. coli. Estos fragmentos son diseñados específicamente para generar anticuerpos policlonales con elevada selectividad.
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